猪精液稀释剂的研究进展

公猪精液体外保存，是猪人工授精技术的重要环节，稀释剂的好坏是影响猪精液保存时间的主要因素，目前国内采用的稀释粉大部分是从国外进口的产品，还有小一部分是引进配方自行生产加工。稀释粉市场比较混乱，鱼龙混杂，没有专门化的评定标准和机构，使得生产者在购买稀释粉时比较盲目。因此，开发具有自主知识产权的稀释粉产品，打造国内最好的稀释粉品牌，势在必行。

目前常用的稀释粉配方有BTS、Kiev、Modena、Zorlesca、Androhep以及各种配方的改进配方，稀释液按精液保存时间可分为短效、中效、长效和超长效稀释剂，稀释剂中影响精子活力和功能的因素有pH值、离子类型和强度、介质渗透压以及抗菌素等，配方组成包括营养剂、缓冲剂、保护剂以及其他添加剂。

1营养剂

精液由精子和精清组成。精子不能合成有机物质，也不能贮存有机质，需要从精清中摄取，而精清中的营养物质含量有限，不足以长期维持精子活动需要，它会不断消耗能量(自身)而衰竭，因此要延长精液的保存时间，必须对精液进行稀释。精子代谢以利用果糖酵解为主，也可以利用葡萄糖、乳糖、甘露糖等小分子单糖。稀释剂中多用葡萄糖作为营养剂添加，同时葡萄糖的含量还影响稀释液的渗透压，猪精子可耐受的渗透压为240～380 mOsm/kg，维持一定的渗透压也是精液保存必不可少的条件之一。黄建国(1997年)，通过添加葡萄糖进行渗透压的调整试验，结果表明在一定范围内冰点下降度(0.42～0.72)，保存效果组间差异不显著。

2缓冲剂

猪新鲜精液的pH值为7.2～7.5，降低pH值可使精子代谢和运动水平降低，从而延长精子的存活时间。但也要防酸中毒，常用酸性缓冲剂有：柠檬酸钠、碳酸氢钠、酒石酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠等。这些弱酸盐类可以在溶液中维持水解-电离平衡，从而将稀释后的精液pH值控制在一定的范围内，确保精子不会因为pH的剧烈变化而死亡。目前，稀释液中还可添加Tris、Hepes等缓冲能力更强的缓冲剂。

另一方面，稀释液中的离子类型和强度对精子的活率有影响，较低浓度的氯化钾可以维持精子膜上Na+-K+泵的运转，防止细胞外K+耗尽而使精子丧失活力。还有些离子不利精子的存活，如有缓冲作用的HCO3-过量会导致精子质膜结构的改变诱发获能，Ca2+跨膜流入细胞会启动精子获能引起顶体反应，虽然获能是完成受精过程必需的，但对精子的保存却有害，因此在稀释液配制过程中需用双蒸水，并控制HCO3-的添加量，同时还可加入EDTA来螯合Ca2+等有害的金属离子。