重庆地区猪弓形虫病的血清学调查与分析

重庆地区猪弓形虫病的血清学调查与分析

徐斌 张夏兰 曾政 冯超 苏兵 何琴

1.重庆市巴南区动物疫病预防控制中心；2.重庆市动物疫病预防控制中心

弓形虫病（toxoplasmosis）又称弓形体病，是由当地弓形虫在人和动物体内寄生而引起的人兽共患原虫病。在畜牧业生产中，弓形虫病可引发母猪流产、产死胎或产弱仔，急性发病猪体温升高达40.5℃～42.3℃，稽留热、咳嗽、呼吸困难、体表淋巴结肿大。猪群感染弓形虫后，除了引起猪大批死亡外，还引起不同程度的繁殖障碍性疾病。张沛通过对规模化猪场的调查发现，74.1%的母猪流产是因弓形虫病导致的。有关重庆地区猪弓形虫流行情况的研究资料很少，白明强等用间接血凝试验（IHA）检测了674份猪血清的弓形虫抗体，其阳性检出率为55.34%，其中种猪的阳性率为55.56%，屠宰场生猪的阳性率为51.88%。谭其军对重庆17个区（县）283头猪血清用ELISA方法进行了弓形虫的感染情况调查，结果显示，重庆地区猪弓形虫感染阳性率为60.42%。曾政等对重庆37个发病猪场进行了疫病监测，发现圆环病毒和弓形虫双重感染的猪场占检测猪场的48.65%。为更全面地了解重庆地区猪弓形虫病的流行和分布情况，本研究于2011年采用ELISA方法对重庆一圈（一小时经济圈）两翼（渝东南和渝东北）地区的3510份猪血清进行了弓形虫病的流行病学调查，以期为重庆地区猪弓形虫病的防控提供数据参考。

1 材料与方法

1.1 试剂

猪弓形虫抗体检测试剂盒（批号：120101），购自深圳绿诗源试剂有限公司。

1.2 血清样本

血清样本分别于2011年5月份、8月份、11月份采自重庆地区39个区（县）的规模猪场、屠宰场、散养户和种猪场，其中散养户猪血清1304份，规模猪场猪血清922份，屠宰场生猪血清894份，种猪场种母猪血清390份，共3510个血清样本。

1.3 猪弓形虫抗体的检测

在反应板孔中加90μL样本稀释液，再加入被检血清10μL，振荡10s，充分混匀，置于37℃温育30min。弃去孔内液体，用洗涤液洗涤5次后拍干，加入酶标记物100μL，置于37℃温育30min后，弃去液体，洗涤5次后拍干，加显色剂A和B各50μL，振荡混匀，37℃避光反应15min后，加入终止液50μL，振荡10s，充分混匀，5min～30min内用酶标仪测定其在波长450nm下的光密度值，检测的每批血样均设标准阴性、阳性和空白对照。操作步骤按猪弓形虫抗体检测试剂盒（ELISA法）说明进行。

1.4 结果判定

临界值的计算：检测10份阴性血清，每份设3个重复，计算D450nm的平均值和标准差，临界值-阴性血清样品D450nm的平均值+3s。

2 结果

2.1 不同地区猪血清样本的弓形虫抗体检测

本次共调查猪血清样本3510份，检出弓形虫抗体阳性样本2522份，阳性率为71.85%。各区（县）均检出了弓形虫抗体阳性样本，阳性率从16.67%到100%不等，其中有29个区（县）弓形虫阳性率达到60%以上（见表1）。

2.2 不同来源猪血清的弓形虫抗体检测

2.3 不同季节猪血清样本的弓形虫抗体检测

3 结论

笔者采用ELISA方法对重庆地区猪弓形虫的感染情况从时间、空间和猪群间的分布上进行了全面的调查，样本采集量大，来源覆盖了重庆所有猪养殖区域，代表性强。本试验采用的ELISA检测方法灵敏度高，准确性好，检测结果科学、可靠。本次调查采用ELISA方法对采集的重庆39个区（县）的散养户、规模猪场、种猪场和屠宰场的3510份血清样本进行了检测，共检出弓形虫抗体阳性样本2522份，平均阳性率71.85%，比谭其军等报道的重庆地区弓形虫血清抗体阳性检出率（60.42%）高11.43个百分点，比沈克飞等报道的重庆主城区宠物犬、猫弓形虫抗体阳性率5.6%、14.1%分别高66.25、57.75个百分点；比薛霞等报道的上海地区规模化猪场弓形虫病阳性率66.7%高5.15个百分点，表明重庆地区猪的弓形虫感染情况呈蔓延上升趋势。

从地域分布上看，猪弓形虫感染在渝东北、中部地区和一小时经济圈北部区（县）偏高，而渝西和渝南地区相对较低，但其分布不具有明显的地域特点。

根据对不同季节采集的猪血清样本的试验统计结果分析，冬季是猪弓形虫发病相对较低的季节，这可能与猪弓形虫在寒冷的冬季不太活跃的流行病学特点有关；春季气温开始回升，猪弓形虫发病率开始上升；在8月份炎热的夏季，适宜很多病原生长繁殖，是大多数疫病发病的高峰季节，统计结果显示也是猪弓形虫病发病的高峰季节，这和其他大多数猪疫病的流行规律一致。

弓形虫病是一种严重的人兽共患寄生性原虫病，感染弓形虫的猪及其肉制品往往为人类感染弓形虫病的重要传染源。因此，重庆地区猪弓形虫的高感染率应引起相关部门的高度重视。对于猪弓形虫病的防控，主要应加强饲养管理，搞好圈舍环境卫生，在圈舍周围对犬、猫等动物进行隔离，同时加强种猪场猪弓形虫病的检疫，逐步淘汰感染种猪，净化猪群，确保公共卫生安全。