蓝耳（猪瘟病毒与细菌混合感染诊断及控制2）

4、实验室检测

4.1 细菌分离鉴定

无菌取病猪的肺脏划线接种于血平板、TSA+血清+NAD上培养20小时，肺脏在TSA+血清+NAD上有半透明灰白色的大菌落如图1，革兰氏染色为革兰氏阴性两端深染的短杆菌如图2，初步判断疑似胸膜肺炎放线杆菌；挑取菌液进一步提取细菌 DNA，采用通用引物进行 PCR 扩增，结果显示PCR扩增出特异性条带，鉴定为胸膜肺炎放线杆菌如图3。

4.2 药敏试验

取分离菌株采用世界卫生组织（WHO）推荐的 Kirby-Bauer 法进行药敏试验，共检测 10 种原料药，其中 10 种单方原料药药敏纸片购自北京九州天瑞科技有限公司，检测结果见表 1。从表中可见单方原料药中除了头孢噻呋为高敏外，有3 种为中敏，4种为低敏感，2种不敏感药物。

4.3 病原PCR检测

采集发病病猪扁桃体、肺组织，用猪瘟、蓝耳、圆环、伪狂犬相应的特异性引物，分别进行 PCR 检测，结果显示蓝耳、猪瘟为阳性，圆环病毒和伪狂犬病原检测为阴性。见图4。

4.4 血清学检测

采取50份血清分别进行猪瘟、蓝耳抗体检测，结果表明该场种猪免疫抗体合格率均达到保护要求且离散度小，说明现行种猪免疫程序可行；但仔猪的蓝耳，猪瘟免疫抗体水平合格率偏低，且离散度大，说明免疫程序存在问题，54日龄发病保育猪蓝耳病毒检测为阳性也说明这个问题。

5、诊断及整体控制措施

5.1 诊断结果

根据猪场发病猪只临床症状、病理剖解、细菌分离鉴定及实验室抗原、抗体检测结果进行综合判定，本次感染主要是由蓝耳、猪瘟病毒与胸膜肺炎放线杆菌等引起的混合感染。