猪传染性胃肠炎确诊方法

根据流行病学特点、临床症状和病理变化，可初步做出诊断。但进一步确诊需依赖血清学和病原学诊断，常用的有病毒分离、直接免疫荧光抗体法、免疫电镜法、RT-PCR、血清学检查等实验室检测方法。

（一）临床综合诊断本病多发牛于寒冷季节，不同年龄的猪相继或同时发病，表现水样腹泻和呕吐，1 0日龄猪病死率很高，较大的或成年猪经5 - 7d康复，病死仔猪小肠呈卡他性炎症变化，肠绒毛萎缩。现地兽医技术人员可据此做出初步诊断，尽快采取控制措施。

（二）病原学诊断

1．人工感染乳猪试验：将病猪小肠组织及肠内容物制成悬液，2 000r/min离心取上清经口接种2-3日龄健康乳猪，如果经12 -48h出现典型症状，即可结合流行病学予以诊断，但仍不能排除其他病毒的可能。再结合荧光抗体法可确诊。

2．细胞培养分离鉴定病毒：将小肠组织及内容物制成悬液，过滤除菌后，接种敏感细胞，观察细胞病变。一般需经盲传多代方可见细胞病变。进一步鉴定病毒，可用荧光抗体法和RT-PCR检查细胞培养物。

3．直接荧光抗体法：将感染猪的空肠制成冰冻切片，或刮取空肠绒毛上皮细胞制成抹片，丙酮固30min，而后滴加TGEV特异性荧光抗体，置于湿盒，37 ℃孵育30min，再用PBS冲洗，室温干燥，滴加甘油缓冲盐水，盖玻片封固，在荧光显微镜下检查。TCEV荧光只见于胞浆中。这是目前认为敏感性和特异性都较高的TGE诊断法。

4．免疫电镜法直接用电镜检查病毒粒子可区别冠状病毒和轮状病毒，但不能从病毒的形态特征上区别PEDV和TGEV。区别这两种病毒需用免疫电镜法。

5．RT-PCR可直接检测粪便样品中的病毒。

（三）血清学诊断

常用中和试验。在呈流行性发生的猪群，应采取双份血清（急性期或康复后）或同时收集不同发病阶段的几头猪血清；好采取2 -6个月龄猪血清作试验，感染后7-8d可检出中和抗体。