公猪人工采精技术

人工授精实验室是精液检查、处理、贮存的场所，为了生产出优质的、符合输精要求的精液，一定要把好质量关，保证每一瓶精液的活力不低于0.7级，72小时之内保存活力不受影响，特对实验室的日常运作做如下规定：

1、实验室要求整洁、干净、卫生，每周要彻底清洁一次。

2、非实验室工作人员在正常情况下不准进入实验室。

3、所有仪器设备，应由专人在仔细阅读说明书后按操作规程使用和维护保养，在使用各仪器时更应注意人身安全。

4、应给各种电器设备配备适宜的插座，除冰箱、精液保存箱及恒温培养箱等外，一般电器要求人走断电，无人时干燥箱的设定温度不应高于100℃。

5、物品、器皿的清洗、消毒方法：所有器皿应先用洗洁精或洗衣粉清洗干净，再以蒸馏水漂洗，60℃干燥(玻璃用品干燥温度可高于100℃)后，180℃1小时对玻璃器皿进行干热灭菌，非耐热器皿、用具以沸水或蒸气蒸煮30分钟灭菌。

6、稀释液的配制、精液的检查、稀释、分装一定要按照人工授精操作规程进行。

7、保持实验室仪器设备干净清洁：实验室内使用的仪器设备，如显微镜、干燥箱、水浴锅、17℃精液保存箱、37℃恒温板及电子天平等，应保持其清洁卫生，显微镜镜头(目镜和物镜)，应每2周用二甲苯浸泡一次，以保持其清洁。

8、保持实验室地板、实验台干净清洁。

9、下班离开实验室前一定要检查电源、水龙头、门、窗是否关闭好，确认做到万无一失后方可离开实验室，确保安全。

10、防火防盗，注意安全。

一、采精的操作规程

1、采精员一手带双层手套，另一手持37℃保温杯(内装1次性采精袋)用于收集精液。

2、饲养员将待采精的公猪赶至采精栏，用0.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮，再用温水(夏天用自来水)清洗干净，避免药物残留对精子的伤害。

3、采精员挤出公猪包皮积尿，按摩公猪包皮部，刺激其爬跨假母台。

4、公猪爬跨假母台并逐步伸出阴茎，脱去外层手套，将公猪阴茎龟头导入空拳。

5、用手(大拇指与龟头相反方向)紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将阴茎的“s”状弯曲拉直，握紧阴茎龟头防止其旋转，公猪即可射精。

6、用四层纱布过滤收集浓份精液于保温杯内的一次性采精袋内，最初射出的少量精液精子含量很少，可以不必接取，有些公猪分2～3个阶段将浓份精液射出，直到公猪射精完毕，射精过程历时5～7分钟。

7、采精员应注意安全，一旦公猪出现攻击行为，采精员应立刻逃至安全角。

8、下班之前彻底清洗采精栏。

9、采精期间不准殴打公猪，防止出现性抑制。

10、采精频率：成年公猪每周2次，青年公猪(1岁左右)每周1次，最好固定每头公猪的采精频率。

11、公猪的采精调教

(1)后备公猪7月龄开始进行采精调教，每次调教时间不超过15分钟。

(2)一旦采精获得成功，分别在第2、3天再采精1次，进行巩固掌握该技术。

(3)采精调教可采用发情母猪诱导、观摩有经验公猪采精及以发情母猪分泌物刺激等方法。

(4)调教公猪要有耐心，不准打骂公猪，需注意公猪和调教人员的安全。

二、稀释液配制操作规程

1、用电子天平按1000毫升、2000毫升剂量准确称量稀释粉，置于密封袋中。

2、使用前将称量好的稀释粉溶于定量的双蒸水中，用玻璃棒搅拌助其溶解。

3、用滤纸过滤，以尽可能除去杂质。

4、稀释液配好后，应及时贴上标签，标明品名、配制日期和时间及经手人等。

5、要认真检查已配制好的稀释液成品，发现问题及时纠正。

6、4℃保存液态状稀释液，不得超过24小时，超过有效贮存期的变质稀释液应废弃。

三、精液质量检查的操作规程

1、精液量：以电子天平称量精液，按每克1毫升计，避免使用量筒等盛放容器来测量精液体积的方法。

2、颜色：正常的精液是乳白色或浅灰白，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。如带有绿色或黄色是混有脓液或尿液，若带有淡红色或红褐色则是含有血液，这样的精液应舍弃不用，应同兽医寻找原因。

3、气味：猪精液略带腥味，如有异常气味，应废弃。

4、精子活力检查：活力是指精子活动的能力，活力评定一般按0.1～1.0的十级评分法进行，即计算一个显微镜视野中呈直线运动的精子百分率，100%者为1.0级，90%者为0.9级，80%者为0.8级，依此类推，鲜精的活力要求不低于0.7级。

5、精子密度：指每毫升精液中所含的精子数，是确定稀释倍数的重要指针，要求用血细胞计数板进行计数或用精液密度仪进行测定。血细胞计数板计数方法：

(1)以微量加样器采取具有代表性的原精液100微升，3%NaCl900微升，混匀，使之稀释10倍。

(2)在血细胞计数室上放一个盖玻片，取1滴上述稀释精液放入计数板的槽中，靠虹吸作用将精液吸入计数室内。

(3)在高倍镜下对5个中方格内的精子总数进行计数，将该数乘以50万，即得原精液每毫升的精子数(即精液密度)。精液密度仪的使用方法见其说明书。

6、精子畸形率：畸形率是指异常精子的百分率，一般要求畸形率不超过18%，其可用普通显微镜进行测定，但需伊红或姬姆萨染色，利用相差显微镜可直接观察活精子的畸形率。公猪使用过频或高温环境会导致出现尾部带有原生质滴的畸形精子，畸形精子的种类有很多，如：巨型精子、短小精子、双头或双尾精子、顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或与尾部分离、尾部变曲等，要求每头公猪每两周应进行一次精子畸形率检查。

7、按要求做好精液保存记录。

8、实事求是地填写公猪采精记录，从而真实地反应种公猪的健康状况。

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