猪支原体肺炎微量问接血凝试验抗原

本抗原系用猪肺炎支原体Z、C株，接种适宜培养基培养，收获培养物，浓缩、裂解、致敏醛化绵羊红细胞后，经冷冻真空干燥制成。用于诊断猪支原体肺炎。【性状】本品为棕色疏松团块，加PBS后能迅速溶解，不出现肉眼可见的凝块。

【作用与用途】用于诊断猪支原体肺炎的微量间接血凝试验。

【用法和判定】(1)用法a.首先用记号笔在72孔“V”型微量反应板的一边标明被检血清、阳性猪血清、阴性猪血清及抗原对照，各占一排孔。b.滴加稀释剂用微量移液器每孔加0.025mL稀释剂。c.血清稀释使用微量稀释棒先在稀释液中预湿后，经滤纸吸干，再小心地蘸取被检血清立于第一孔中，可以同时稀释11个血清，以双手合掌迅速搓动11根稀释棒，达60次，然后将11根稀释棒小心平移至第2孔，搓同样转速和次数，再移至第3孔(被检血清可以只稀释到第4孔，即血清稀释到1：40)，而阳性猪血清、阴性猪血清必须稀释到第6孔。d.滴加抗原致敏红细胞用微量移液器吸取摇匀后的2％抗原致敏红细胞悬液，每孔加0.025mL。e.抗原对照为0.025mL稀释液加0.025mL2％抗原致敏红细胞悬液，只做2孔。f.振荡加样完毕后，置微型振荡器上振荡15-30s，室温下静置1-2h，观察记录结果。(2)判定以呈现“++”血凝反应的血清最高稀释度作为血清效价判定终点。

凝集反应强度标准如下：

++++红细胞在孔底凝成团块，面积较大。

+++红细胞在孔底形成较厚层凝集，卷边或锯齿状。

++红细胞在孔底形成薄层均匀凝集，面积较上二者大。出现“++’’以上凝集时为红细胞凝集阳性。

+红细胞不完全沉于孔底，周围少量凝集。

±红细胞沉于孔底，但周围不光滑或中心空白。

一红细胞呈点状沉于孔底，周边光滑。

微量反应板静置1-2h后，阳性对照猪血清效价应≥40“++”，阴性对照猪血清效价应<1：5，抗原对照应无血凝现象。

被检猪血清效价>1：10(即达到第2孔以上)时，判为阳性；效价<1：5时，判为阴性；介于二者之间时，判为可疑。

【贮藏】在2-8℃，有效期为6个月；在-15℃为1年6个月。

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