畜牧猪瘟病毒与细菌混合感染及其防控

猪瘟病毒与细菌混合感染及其防控

苏晶1，王亚玲2，沈文正3，张周3，杨慧萍3

1安塞县楼坪乡畜牧兽医站；2泾阳县动物卫生监督所；3杨凌职业技术学院动物工程系

1流行情况及症状

陕西省某猪场存栏母猪、育肥猪、后备母猪共450头。由于地处秦岭深山，一直坚持自繁自养，附近9km内又无养殖场，所以多年来未发生流行病，猪场也不接种猪瘟等各种疫苗。2009年3月，该场从外地购入2月龄小猪170头。购入前没有进行检疫，购入后也未实施免疫接种，未经隔离观察就与该场猪合群。一周后，引进猪开始出现呼吸困难和喘气症状，但未见死亡。随后，腹下及身体末梢部位皮肤点状出血或发绀，病猪转圈、盲目运动、死亡，场内原有后备猪也受到传染，陆续发生类似症状，三周内共死亡60多头。经过反复消毒和多种抗生素轮换治疗，大批死亡得以控制，但不少猪只体弱消瘦，零星死亡不断。此后，该场一直没有接种疫苗。2009年5月，该场肥育猪又出现体温升高、食欲不振、精神萎靡、咳嗽、喘气、发育不良等症状，波及原购进猪和本场自繁猪。发病47头，病情严重的30多头，表现皮毛粗乱，个别猪皮肤有出血点或发绀，走路时拱背，步伐缓慢，喜卧怕冷，日益消瘦，咳嗽，特别在早上剧烈运动后和喂食时连续咳嗽，呈腹式呼吸和犬坐姿势，严重的张口喘气，半个月共死亡8头，部分猪只出现关节肿大及皮肤脓包。从临床症状及死亡情况初步分析，具有喘气病等混合感染，也不排除猪瘟。

2病理变化

对5头濒死期及3头死亡10min内猪耳静脉采血或心脏采血，常规分离血清，并进行解剖，主要病变特点如下。病猪外观消瘦（8/8），部分猪死后腹下呈紫色（2/8）。喉头有出血斑点（5/8）。下颌淋巴结肿大出血，肠系膜淋巴结肿大如绳索，且多呈黑色（5/8）。腹股沟淋巴结明显肿大，肺门淋巴结极度肿大，且呈黑色（6/8）。肺脏心叶和尖叶肉变，中间叶有多处出血性炎性病灶，肺脏被膜下出血，呈黑色。肺脏切面间质增宽，且有黄色胶样渗出物，支气管有白色及淡红色泡沫样液体，肺脏与胸膜黏连（8/8）。心包膜严重水肿，心外膜及心内膜（多在心房）有出血斑（4/8）。肝脏淤血（8/8）。肾脏一种表现是不肿大，贫血，有陈旧出血点，髓质皮质都有出血（6/8）。另一种表现肿大，贫血，表面有许多大小不一的白色坏死灶，被膜难以剥离，且肾脏畸形，有许多沟壑样凹陷，皮质和髓质出血（2/8）。脾脏边缘有出血性梗死（5/8），回盲瓣呈火山口样溃疡（6/8），膀胱有出血点（6/8）。病变显示可能有气喘病等混合感染。

3实验室诊断及药敏试验

3.1猪瘟抗原及抗体检测

将上述5头濒死期猪及3头死亡猪血清分别加入猪瘟抗原快速检测卡加样孔内，每孔100μＬ，室温观察20miN，试验区T和对照区C同时出现紫红色线的共6例（6/8，其中3头为本场自繁自养猪）。

上述6例血清经猪瘟抗体间接血凝试剂盒。

3.2病料镜检及细菌检查

采集皮肤脓液及肿大关节液，涂片染色发现，均为革兰氏染色阳性球菌，多呈链状排列；采集病死猪肺脏做压印片镜检，见革兰氏阳性球菌及革兰氏阴性球杆菌，均未见明显荚膜。肺脏压印片姬姆萨染色还发现大量淡紫色多形态细小的微生物。关节液及肺脏组织分别接种于血液琼脂培养基上37℃常规培养24h。结果发现，关节液中细菌形成圆形小菌落，略显灰黄色，表面光滑、湿润、不透明，直径0.5mm～1mm，周围有溶血环，溶血环宽3mm左右，染色镜检仍为革兰氏染色阳性，链状排列；肺脏组织培养物为灰白色露滴状小菌落，表面光滑、湿润，直径小于0.5mm，染色见革兰氏染色阳性球菌为散在或呈双球菌状排列，革兰氏阴性球杆菌为散在排列。

3.3药敏试验

将从浓汁、肺脏分离的球菌和杆菌的不同菌落用生理盐水混合，均匀涂布于血液琼脂培养基，37℃常规培养30miN，加入15种不同药敏片，37℃常规培养24h，抑菌环直径18mm～21mm判定为高度敏感，15mm～17mm为中度敏感，11mm～14mm为低度敏感。判定发现高度敏感药物四种：头孢唑林钠，阿米卡星，头孢噻肟，羧苄青霉素；中度敏感药物三种：万古霉素，头孢呋肟，妥布霉素；低度敏感药物三种：丙沙星，青霉素，链霉素。五种药物：林可霉素、四环素、阿莫西林、庆大霉素和红霉素。

4诊断与防治

4.1治疗

根据流行情况、临床症状和剖检变化可初步判断该场存在慢性猪瘟和细菌混合感染。亦不排除喘气病等其他疾病可能。把患病猪只分成两组进行疗效对比试验：第一组每50kg体重肌内注射头孢唑林钠1g，早晚各一次。与此同时，按50kg体重2mL剂量在另一侧颈部肌内注射人用阿米卡星，早晚各一次，第二天按50kg体重肌内注射头孢噻肟1g，此后用头孢唑林钠和头孢噻肟交替使用3d～4d，每天只用一种药肌内注射两次。第二组使用核能（复方制剂，含磺胺二甲嘧啶等多种成分。），按1kg体重肌内注射0.1mL，1次/d，用药3d～5d。猪体表及关节的脓包成熟后，按常规外科处理，注射核能三天，一周后好转。

4.2疗效观察

第一组使用当天，部分停食猪只开始采食，第二天，有喘气症状的有大的好转，犬坐姿势卧地不起的猪只开始走动、觅食，张口呼吸症状消失。在经过3d，大群基本恢复健康。但是仍有个别严重的猪只仍见咳嗽、食欲不振、精神不好。第二组治疗当天，喘气及张口呼吸症状有明显的好转，部分不吃食的开始觅食，用药四天后大群恢复健康。两组治疗方案的疗效均理想，只是第二组比第一组对全群疗效更快些。由于猪场担心猪瘟疫苗质量，又打算淘汰病猪，没有接种猪瘟疫苗。但是，两组病猪在三周后仍有零星死亡。

5分析及讨论

5.1本次流行的原因

5.1.1猪群猪瘟的存在

猪场地处偏僻深山，多年也未发生流行病，确实起到了屏障作用。但从死亡病猪检测到猪瘟抗原（6/8），为猪瘟病毒感染。其中3头为本场自繁自养猪，且本场猪与新购进猪都检测到较高水平抗体，而该场多年一直未接种猪瘟疫苗，说明该猪瘟病毒很可能由购进猪带入场内。慢性猪瘟发生的主要根源与本次引进商品仔猪免疫背景不清楚有关。

5.1.2细菌等其他微生物混合感染

病料直接涂片染色镜检及细菌培养均证实，皮肤化脓灶中存在链球菌，肺脏组织中有球菌和杆菌。同时，病猪出现咳嗽、腹式呼吸、犬坐姿势、张口喘气等症状，剖检见肺脏心叶和尖叶肉变，肺脏压印片姬姆萨染色发现淡紫色多形态微生物，可以确定有猪肺炎支原体感染。本次没有进行更深入的血清学及分子生物学诊断，故不排除免疫抑制性疾病等其他病原感染。

5.2防控措施

当今，猪的流动范围加大，引进商品仔猪或种猪时，要采取严格的防疫措施。

5.2.1购进猪的隔离不容轻视

盲目购进接种情况不明的商品仔猪，可能给猪场传入疫病。购进后未经隔离检疫，就与该场猪只并群，这是引发3月份第一次发病的直接原因。因此，隔离一个月，做一次血清学检疫，补种一次，驱虫一次，符合条件时才可以进入生产猪群。

5.2.2建立健全防疫制度

引进猪由于长途运输、环境应激等因素，往往造成抗体水平降低及疫病爆发，所以加强免疫接种才是根本出路。同时，采取消毒、定期检测抗体、反复检疫和淘汰等措施，才能使猪群保持健康、稳定。

5.3药敏试验及敏感药物的交替使用

不同细菌对同一抗生素的敏感性不同，同一细菌不同菌株对同一种抗生素的敏感性也有差异，而猪病混合感染多，分离到细菌后，往往对不同细菌的菌株一一进行药敏试验，既增加了检验成本，又不符合患病动物体内微生物群落环境。本次从皮肤脓汁、肺脏分离到生长特征不同的数种菌落后，没有分别做药敏试验，而是将几种不同菌落做成混合液进行药敏试验，既接近患病动物体内的混合感染状态，又具有快速简便的优点，为生产中实用的药敏试验策略。

在本次防治实践中，利用头孢唑林钠、头孢噻肟、阿米卡星三种高敏感药物交替使用，取得了理想效果。“核能”为复方制剂，因含磺胺二甲氧嘧啶、甲氧苄啶、左旋氧氟沙星、三氮咪、乙胺嘧啶多等十多种未知成分，难以分析药效，故没有纳入药敏试验。

5.4处理保温与通风的关系

本场在冬春寒冷季节，采取猪舍覆盖塑料薄膜保温的技术。开春时室内温度高达26℃，但通风不良，不利于猪舍空气中病原的排出，加之存在其他疾病的可能，造成死淘率上升。寒冷时节固然要注意保暖，但在发生呼吸道疾病时更要加强通风换气。