猪圆环病毒病确诊方法

由PCV-2感染引起的断奶后多系统衰竭综合征，依据流行特点和临诊症状、剖检病变，可以做出初步诊断，确诊需依靠实验室相关技术c而与PCA7 -2感染有关的繁殖障碍、肺炎、肠炎等，仅靠

临诊症状是没有诊断价值的。

（一）临床诊断

(1)PMWS主要发生在5- 12周龄的仔猪，仔猪断奶前生长发育良好。

(2)在一定时期内，猪场中同窝或不同窝的断奶仔猪既有呼吸道症状，又有腹泻等表现，抗生素治疗无效或疗效不佳，病程长的猪生长发育迟缓、体重下降，有时出现皮肤苍白或黄疸。

(3)死亡猪只剖检具有PMWS的病理变化，尤其是淋巴结肿胀，切面出血或呈灰黄色，脾脏轻度肿胀，肺脏肿胀，间质增宽，表面散在有大小不等的褐色实变区3其他脏器也可能有不同程度的病变和损伤。根据临床症状和淋巴组织、肺、肝、肾、脾的特征性病变和组织学变化，可以做出初步诊断。确诊依赖病毒分离和鉴定。还可应用免疫荧光或原位核酸杂交进行诊断。

（二）病毒分离鉴定

病毒的分离与鉴定无PCV污染的PK15细胞最常用于PCV-2的分离。可取死亡猪的肺脏、淋巴结、肾脏、血清等作为病原的分离材料。由于PCV一2在细胞培养中不产生细胞病变，因此，病料盲传1-3代后应进行PCV-2抗原或核酸的检测加以鉴定。

（三）病毒的检测

可采用PCR，原位核酸杂交、间接免疫荧光试验、间接免疫过氧化物酶试验等直接检测病料中的PCV2核酸或抗原。

（四）抗体检测

可采用酶联免疫吸附试验(EIJSA)，免疫荧光抗体技术、免疫过氧化物酶单层试验等，检测猪血清中的PC V-2抗体。但由于PCV-l和PCV-2之间存在抗原交叉反应，因此已有的方法不能完全区分PCV-1和PC V-2感染。制备PC V-2特异性的单克隆抗体，或者特异性的重组抗原能够满足建立特异性血清学方法的需要。国内已建立了利用基因工程表达的PCV-2重组蛋白作为抗原的ELISA抗体检测方法。需要注意的是目前在临诊上多种病原的合并感染十分普遍，因此在检测PC V-2的同时，应同时检测其他病原体（如PRRSV,PRV, PPV，副猪嗜血杆菌等）。

因为PCV-2的感染是很普遍的，大部分是处于隐性感染，因此只有在病猪身上分离到病毒或检测到病毒的遗传物质，才能确诊。现在我国有很多实验室可以进行病毒的检测或分离，如中国农业大学、华中农业大学、南京农业大学、广西农业大学、哈尔滨兽医研究所等。

（五）电镜检查

用脾和淋巴结样品，2%戊二醛固定，制成超薄切片，可观察到细胞核内堆积大量的无囊膜病毒粒子。