猪戊型肝炎的流行和防控

戊型肝炎(Hepatitis E，HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)引起的一种急性、自限性病毒性肝炎。HEV于1982年首次被发现，最初命名为非甲非乙型肝炎病毒，1989年正式命名为戊型肝炎病毒。2004年第8次国际病毒学分类委员会会议上，HEV被单独归为戊型肝炎病毒科戊型肝炎病毒属。

目前，戊型肝炎广泛发生于世界各地，每年全球有2000万人感染该病，其中5.66万人死亡。卫生条件差的发展中国家常会大规模暴发流行，发达国家一般为散发。2016年9月乍得安提曼暴发HE，11人死亡。2017年4月尼日尔东部迪法地区暴发HE，截至5月3日，共报道282例疑似病例，包括27人死亡，其中孕妇26人。我国是HE主要流行区之一，近几年来，该病有逐渐蔓延的趋势。

HEV可感染包括人在内的多种动物，猪是HEV的重要储存宿主，可通过猪群、猪肉制品或内脏器官等传播。1997年，美国学者Meng等发现了猪源的HEV，与人的HEV有很高同源性，并可感染黑猩猩和恒河猴，表明该病毒存在种间传播方式，随后世界各地陆续有相关报道，确定HE为一种人兽共患性传染病。开展猪HE的研究，具有重要的公共卫生学意义。本文从猪戊型肝炎的病原学、流行病学、发病机理、诊断及防控等几个方面进行阐述，以期为该病的防控提供参考。

1、病原学

HEV病毒粒子呈球形，无囊膜，直径27mm～34mm，核衣壳呈20面体立体对称。病毒表面呈尖刺和锯刺状，内部呈现2种不同形态，一种内致密，为完整的病毒颗粒;另一种内部透亮，为不含完整基因的病毒颗粒。蔗糖梯度离心前者沉降系数为183S，后者为165S。HEV在酒石酸钾和甘油中的浮力密度为

1.29g/cm3，在氯化铯中的浮力密度为1.40g/cm3。HEV不稳定，对高盐、氯化铯、氯仿和碘类消毒剂敏感，当反复冻融时或在蔗糖中可结成团块，致病毒失活。煮沸3min可灭活病毒，2℃～8℃最多能保存5d，-20℃不稳定，可长期保存于液氮中。HEV在碱性环境中稳定，在有镁、猛离子存在情况下可保持其完整性。在生肉或没有完全熟的肉制品中HEV也可保持活性。HEV核酸为单股正链RNA，大小约7.2kb，5′端和3′端为非编码区，中间有3个开放阅读框(ORF)，分别为ORF1、ORF2、ORF3。ORF1大小约5kb，不同毒株核苷酸序列变化最大，主要编码非结构蛋白包括RNA依赖性RNA聚合酶，半胱氨酸蛋白酶和解螺旋酶等，与病毒RNA复制有关。ORF2约2kb，其核苷酸序列最保守，其中与ORF3重叠的部分是最保守的部分，主要编码衣壳蛋白，在病毒免疫逃避和病毒粒子形成过程中发挥很大作用。ORF3有372bp，大部分与ORF2重叠。编码的蛋白能够刺激机体产生IgM，对戊型肝炎的早期诊断有重要的意义。HEV只有1个血清型，可分为8个基因型，其中，Ⅰ型和Ⅱ型仅发现于人，Ⅲ型和Ⅳ型为人兽共患。其中，猪是最主要的宿主，Ⅴ型仅发现于禽类，其余基因型研究较少。目前，虽然关于HEV细胞培养的相关研究报道很多，但都不成熟，不能被大家公认，黑猩猩、食蟹猴、恒河猴、非洲绿猴、须狨猴对HEV敏感，可用于分离病毒。

2、流行病学

HE在全球范围广泛流行，尤其是发展中国家多发，我国也是HE的主要流行国家之一。HEV可感染灵长类、猪、牛、羊、鸡、犬、猫、马、骆驼、驴、猫鼬、鹿、啮齿类等多种动物。患病和隐性感染的人或动物是主要传染源。潜伏期末期和急性期早期粪便排出的病毒量最高，传染性最强。

HE对人的危害严重，症状一般为黄疸、乏力、恶心、呕吐、肝肿大、衰竭，严重的可致死亡，该病占我国急性肝炎比例的五分之一，病死率比其它病毒性肝炎高。潜伏期4周～9周，通常为自限性，主要危害青壮年，病死率一般为2.5%，对孕妇的危害尤其严重，死亡率可高达20%，也可导致孕妇的流产、死胎，儿童和老人发病率一般较低。

该病具有明显的季节性，冬春季节多发，雨季或洪水过后常暴发流行。HE主要是粪口传播，HEV随宿主粪便排出，可污染饮水及食物，导致疾病的暴发流行，另外还有血液传播、母婴传播、接触传播等。猪在人HE的发生中起着很重要的作用，和猪密切接触是HE感染的危险因素之一，且与猪接触的职业人群血清抗HEV抗体高于非职业人群，同时与猪接触的工作年限也是HE感染的危险因素。

猪的感染很普遍，感染猪的病毒血症可持续1周～2周，之后可从粪便排毒，持续时间大约1个月。能感染猪的HEV都能感染人，曾有人食用被污染的猪肉、猪肝等引起人发病的报道。戊型肝炎在世界范围内广泛流行，第一次HE于1955年至1956年发生在印度的德里地区，因水源污染引起，之后戊型肝炎在亚洲、南美洲、中东和非洲等地区流行。2001年日本报道约有650万人感染了HE，系因饮用了HEV污染的水所致。我国曾发生11次HE的暴发或流行，是HE高发区之一，在我国发生的病毒性肝炎中，戊型肝炎约占10%。1986年至1988年我国新疆南部发生了HE，是世界上迄今为止规模最大的一次，共119280人发病，707人死亡，其中孕妇414人。除新疆外，吉林、辽宁、内蒙古及山东等地均有HE散发的报道。近年来我国HE发病数呈现连续增长的态势，死亡率也在逐年增加，已经被列为因HE发病和死亡而引起的经济负担最为严重的国家之一。

3、发病机理

HEV主要经粪口传播，含HEV的粪便污染饲料及饮水后，病毒经口感染，由肠道经门静脉感染肝细胞，在肝细胞浆内增殖复制，复制后的病毒颗粒散布于肝细胞浆基质中，并可分泌于毛细胞管而后混入胆汁中，致肝细胞气球样变、嗜酸性变、嗜酸性小体、灶性坏死及炎性细胞浸润，浸润的细胞主要是淋巴细胞和单核巨噬细胞。电镜发现肝细胞肿胀，内质网扩张，线粒体形态异常，糖原减少。

病毒在肝脏内进行一次性繁殖后，约在潜伏期末及急性期初可出现短暂的病毒血症，最后经粪便排出体外。病毒约2周左右逐渐从粪便中消失，带病毒的粪便可再次经口引发新的感染。猪血清学检测表明，病毒可感染所有阶段的猪，母源抗体一般在2月龄时下降，2月～5月龄猪更易感，猪感染后一般症状不明显，有轻度到中度的肝肿大和肠系膜淋巴结肿大，肝酶水平不升高，繁殖性能和胎儿不受影响，也未见子宫内传播。

4、诊断

猪HE的准确快速检测对人HE的防控有重要意义。猪感染HEV后，很少有明显的临床症状，这给猪HE的诊断带来很大的不便。一般采用实验室方法进行诊断，猪HEV和人的HEV在遗传学上没有太大差异，因此，用于人HEV的诊断方法也适用于猪HEV的诊断。常用的实验室诊断方法有ELISA和分子生物学方法。

ELISA是目前用于检测血清HEV抗体最常用的一种方法，检测的血清抗体主要是IgG、IgM和IgA，其中以间接ELISA用途最广。IgG抗体的检测较常用，一般在发病2周后可检测到，可持续1年甚至数年，IgG阳性说明曾经感染过HEV。IgM阳性说明当前正在感染HEV，需要及时行抗病毒的药物治疗为佳，IgA也是HEV的急性指标，可代替或辅助现有IgM诊断试剂用于HE诊断。有时需要同时检测这3种抗体，对检测结果综合判断分析，提高检测的准确性。ELISA试验时包被用的HEV抗原有两种，即合成肽抗原和表达抗原，目前最受关注的是表达抗原。常用的表达抗原有ORF2的表达抗原，ORF3的表达抗原以及同时含有ORF2和ORF3编码产物的重组表达抗原。但表达的蛋白在翻译后加工和修饰方面存在缺陷，使蛋白的生物学活性受到限制，而且表达过程中同时表达了一些原核细胞的成分，使得抗原性改变，导致交叉反应，增加了假阳性几率。合成肽可以有效地排除非特异性干扰，但由于肽段比较短小，包被后易造成表位无法完全呈现，影响检出率，导致假阴性。常用的分子生物学检测方法有RT-PCR、套式RT-PCR、荧光定量RT-PCR等。分子生物学检测方法灵敏度高、特异性好，但也存在一些问题，由于HEV的基因型不同，因此用于PCR的引物设计非常关键。常根据保守型较高的ORF2、ORF3设计检测用引物，检测时一般选取的病料是血清、胆汁、肝脏或粪便。病料样品一定要新鲜，因病毒血症持续时间和粪便的排毒时间都很短，而且载毒量低，所以有时采取粪便检测的方法不稳定，一定要掌握粪便采取的时机。

5、防控措施

戊型肝炎是一种重要的人畜共患性疾病，目前，尚无有效的治疗方法，只能采取措施进行预防。猪作为HEV最主要的自然宿主，在HE的发生和发展中起着非常重要的作用，猪HE的防控具有重要的公共卫生学意义。要做好猪HE的防控工作，有条件的话最好开展猪场HE的流行病学调查，对其感染特性及遗传进化特性进行监测，掌握本场的猪HE流行情况。加强环境管理，及时清除粪便，做好消毒工作，定期检测饲料及饮水。猪场消灭蚊、蝇、老鼠等可能传播该病毒的媒介动物。强化饲养管理，提高猪群免疫力。加强外购猪的检疫，减少外来HEV传入本场，以保障本场猪的安全。加强工作人员的净化，杜绝患戊型肝炎的人员从事猪场的工作，防止戊型肝炎传染给猪。加强食品从业人员健康检查，避免HE患者及病毒携带者从事相关工作。

兽医相关工作者也应该做好自身的防护工作，避免因猪感染引起的职业病的发生，个人需养成良好的卫生习惯。加强水源和粪便管理，避免接触地表水，防止蚊蝇叮咬，保证饮水清洁和食品卫生安全，提高抗病力。对患者要及时进行隔离和治疗。加强宿主动物和相关肉类产品的管理，猪肉制品和肝脏要煮熟后食用。当前，已有人用的HE疫苗上市，有条件的人群可接种疫苗进行预防。考虑到成本等因素，人用的HE疫苗不适合用于猪。

总之，现阶段对猪HHE的最有效防控办法就是严格控制传染源切断传播途径，建立完善的监测体系，同时对猪肉产品应该进行实时严格监控，制定猪戊型肝炎检测的标准。相信，随着科技的发展会有猪用HE疫苗研发成功，从而更好的防控该病，确保养猪业和公共卫生安全。

6、小结

HE给人类健康和畜牧业生产造成巨大危害，是一种重要的人兽共患病。猪群HEV感染率较高，猪是HEV最主要的自然宿主，在HEV传播中的作用不可忽视，具有重要的公共卫生和食品安全意义。我国是养猪大国，也是猪肉消费大国，全国每年要消费5亿～6亿头猪，HEV由猪传染人的风险很高。目前，猪HE已经引起了相关科研工作者的重视，人们逐渐认识到HE的危害，但对猪HE的发病规律与致病机制研究不够深入，仅限于局部区域的流行病学调查和动物感染试验，本文的目的是希望大家正确看待HE及猪在HE病毒传播过程中的作用，希望能引起人们尤其是兽医相关工作者的足够重视，做好自身防控工作，避免人兽共患性职业病的发生。日常做好卫生消毒工作，饮用干净无污染的饮水，不吃未煮熟的猪肉或猪肝，有条件话可接种人用HE疫苗预防，并定期体检，争取做到既重视，又不谈猪HEV色变，不过分妖魔化，采取正确的防控措施。除猪之外也有使用贝类及牛奶后感染HE的报道，其它动物的HE相关研究报道更少，有待于进一步研究。目前尚未有猪用HE疫苗，相信，随着分子生物学的发展，猪HEV基因疫苗的研制和开发必将出现新的突破，猪戊型肝炎也会在不久的将来得到有效控制。