猪场细小防控难上加难 该如何诊断防控 （2）

目前来说，已有的疫苗效果大都不错，但是新毒株的出现可能会给疾病防控带来更大的挑战。依据近年来的研究，我们可以将PPV分为两类基因型，包括“旧”基因型和“新”基因型。“新”基因型以德国分离的变异株PPV 27a为代表，而在此之前的毒株则被称为“旧”基因型。PPV27a与“旧”基因型相比，主要有两点不同：（1）病毒的抗原表位发生了变异，之前的毒株对其交叉保护效果差，但是与之相反，27a型对“旧”基因型毒株的交叉保护效果仍然很好。（2）27a型毒株可能存在免疫逃避机制，因为与“旧”基因型相比，27a型毒株感染后产生的针对27a型毒株自身的中和抗体也不高。“新”基因型的出现给PPI防控带来了更大挑战，同时也提示人们尽管PPI目前还可防可控，但是如果不重视疾病防控与净化，任由病毒长期大面积污染，病毒的变异可能会加剧，对养殖场来说就是巨大的潜在疾病风险。

3 发病特点

PPV主要引起母猪繁殖障碍疾病，母猪临床表现包括不发情、空怀、流产、返情、产死胎、木乃伊胎、产弱仔等。多数猪场以后备母猪和低胎次母猪发病为主，但是需要注意，新建猪场、种源复杂的猪场、驯化和免疫不足的猪场，高胎龄母猪发病情况与低胎龄母猪一样严重。发病母猪自身很少出现繁殖障碍以外的疾病症状，体温、采食、精神状态等不会出现明显变化。病毒感染母猪后需要10～14d或更长时间才会感染胎儿，病毒在胎儿之间的传播间隔为4d。临床上母猪繁殖障碍表现会因其感染时间（妊娠时间）不同而有明显差异，妊娠早期（35d以内）的感染主要引起母猪子宫的变化，可以导致母猪流产；没有流产的母猪由于妊娠早期的胚胎无骨组织形成，感染死亡的胚胎会被母体完全吸收，在母猪分娩时也看不到死胎或木乃伊胎，但是总产仔数会减少。母猪妊娠中后期的感染可以引起胎儿的死亡，受胎儿骨组织的影响，胚胎不会被母猪完全吸收，时间长的死亡胎儿会出现木乃伊化表现，死亡时间短的则表现为死胎。通常可以根据木乃伊胎的大小来推测感染时间，公式如下：妊娠天数=胎儿长度×0.3+21。妊娠70d以后胎儿已经具有产生主动免疫的能力，因此，即使胎儿被感染也不一定导致死亡，但是母猪产出弱仔的数量可能增加，同时这些仔猪还可能长期携带病毒。

除了可以引起母猪繁殖障碍疾病以外，PPV还可以引起仔猪的非化脓性心肌炎、皮炎、肠炎等问题。引起的皮炎以鼻腔和口腔中裂缝样、水泡样病变为主，当与PCV2（圆环病毒2型）混合感染时，还可以加重断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的发生；在肠炎型病例中病毒多以混合感染形式存在，比如PPV和PEDV（猪流行性腹泻病毒），PPV和PoRV（猪轮状病毒）等。

4 疾病诊断

用于诊断细小病毒病的方法有很多，主要包括临床诊断、血清学诊断、病原学诊断。临床上可以根据母猪和仔猪的病理变化做出初步推断，通常当母猪出现繁殖周期延长（返情、流产、空怀、不孕），分娩延长并伴有木乃伊胎时，首先应该考虑PPI；此时，如果低胎龄母猪发病率又明显高于高胎龄母猪，则更加应该怀疑PPI。除母猪症状以外，初生仔猪的病理状态也可以作为临床诊断的依据：PPI引起的胚胎死亡可以发生在妊娠的各个阶段，同时，因为病毒在母猪与仔猪、仔猪与仔猪之间的传播上存在时间差，因此同一窝感染仔猪会表现出大小不一的木乃伊胎、死胎，而且可能有部分仔猪依然存活。临床诊断可以作为紧急处理和初步诊断的依据，当条件允许时，仍然应该通过实验室诊断来进行疾病确诊。

在血清学检测中，利用血凝抑制实验（HI）进行PPV抗体检测是早期被应用最广泛的检测方法。但是因为HI检测结果容易受温度、稀释液、红细胞种类、供血动物遗传特点和年龄等影响，因此已经逐步被相应的ELISA检测方法取代了。比较而言，ELISA方法重复性好，操作更加便捷、快速。依靠PPV抗体检测进行疾病诊断时最大的挑战是无法区分免疫和感染抗体，单凭血清结果无法进行疾病确诊。针对这一问题，成对跟踪仔猪和母猪血清抗体变化有一定的指导意义，收集分娩时以及随后2～4周的血液进行检测，如果PPV抗体随时间推移明显升高，则说明发病与PPV有关。另外，吃初乳前仔猪血液、死亡胎儿脐带血PPV抗体阳性也可以用于疾病确诊。当收集不到死亡胎儿血液时，可以将胎儿或其内脏置于塑料袋中4℃过夜，收集体液进行抗体检测。仔猪可以通过初乳获得高滴度的抗体（维持9～22周），所以对已经吃到初乳的仔猪进行抗体检测没有意义。

相比抗体检测，PPV病原检测具有快速、准确、敏感性高等特点。因为PPV的感染特点，猪场发现疾病的时间多在感染后1个月以上，因此，母猪分泌物和血液不是病原检测的合适样本。不过，发病母猪流产胎儿的各脏器组织都可以用于检测，一般建议采集死亡胎儿的肝脏、肠道、肺脏组织，而不仅仅是胎儿表面分泌物，采样时最好选择长度在16cm以下的死胎或者同窝存活的弱仔。当选择木乃伊胎进行检测时，需要考虑假阳性问题，假阳性原因：（1）胎儿死亡，组织自溶被母体吸收；（2）母猪感染产生的针对性抗体进入到自溶组织中中和病毒，降低病毒含量。此外，对于繁殖障碍疾病，因为疾病发生时并非所有仔猪都一定会受到感染，为了防止漏检，采样仔猪数量应该有要求，采样仔猪数占整窝仔猪数的1/3以上，例如总产仔数为15头，则应至少采集5头仔猪的样本。

5 PPV疫苗

针对PPI免疫防控，世界范围内应用最多的是灭活疫苗，国内只有灭活疫苗。不同地区选择的毒株有一定差异；其中，国外应用广泛是PPV NADL-2毒株，该毒株属于弱毒株，对仔猪没有致病性，而且免疫后可以快速产生高水平抗体。国内PPV灭活疫苗使用的毒株包括PPV CP-99、S-1、BJ-2、WH-1株等。从兽药信息网数据来看，2021年全国共有19家PPV疫苗生产企业，按照批签发数量排名，排名前6的批签数量占总数量的69%以上。

需要注意的是，尽管PPV只有一个血清型，但是不同毒株产生的抗体水平还是存在很大差异。从已发表的一些文章可以看出，同样来自德国的两种商品疫苗PPV NADL-2与PPV IDT产生的抗体水平差异明显。整体来看，PPV NADL-2无论是中和抗体，还是HI值都要明显高于IDT株。除此以外，作为灭活疫苗还需要考虑佐剂的效果，优质的疫苗佐剂不仅可以保证免疫的安全性，同时还可以增加免疫效果。对于养猪场来说，应该根据疫苗使用的实际情况来进行疫苗免疫程序制定，对于免疫效果好的疫苗可以每5～6个月进行一次疫苗免疫，而对于免疫效果稍差的疫苗应该3～4个月进行一次免疫。从疾病特点、流行情况以及疾病带来的巨大损失等综合考虑，所有种猪都应该在配种前完成疫苗免疫，这样一方面可以减少疾病的发生，另一方面还可以缩短母猪繁殖周期，提高产仔数和生产效率。由于公猪精液可以造成PPV的传播，因此，公猪也应该进行疫苗免疫，推荐2～3次/年。