猪瘟（蓝耳病与猪链球菌混合感染的控制）

猪瘟、蓝耳病与猪链球菌混合感染的控制

邓仕伟，强正虎，谢坤

四川恒通动物制药有限公司

2013年7月，四川某规模化猪场的种猪发生大量不孕、流产，保育猪也暴发了呼吸道病。笔者前往就诊，并委托四川农业大学实验室进行诊断，其运用RT-PCR与PCR方法针对猪瘟、猪高致病性蓝耳病、猪伪狂犬病和猪圆环病毒病进行了病原检测，同时采用ELISA试剂盒检测了猪瘟、猪蓝耳病和猪圆环病毒病的抗体水平，并作了细菌分离鉴定和药敏试验。结果表明，该场存在CSFV、PRRSV及链球菌混合感染，药敏试验显示：所分离细菌对强力霉素、氟苯尼考和氟哌酸等药物敏感。根据上述诊断采取了隔离、消毒、合理用药、紧急免疫、淘汰等措施，三周时间控制了疫情。

近年来，我国养猪业正在蓬勃发展，日趋规模化、集约化，但同时疫病也更加复杂化，猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征（又称：蓝耳病）、猪伪狂犬病和猪圆环病毒病就是长期困扰猪场的重要病毒病，同时细菌病的继发感染危害也日益严重。因此，对疫病进行准确的诊断具有重大意义。2013年7月19日，四川某规模化猪场发生了疫病，笔者应邀前往就诊。

1临床症状

该场位于丘陵地区，气候比较潮湿，其能繁母猪存栏1000余头，经常出现流产、屡配不孕等繁殖障碍问题，7月份以来流产和不孕的母猪达到平常数量的3倍。保育仔猪断奶时正常，但在断奶后20天左右时常发病，主要表现为呼吸困难、喘气、体温升高和神经症状等，发病较急的两天内死亡，病程较长的病猪主要表现出被毛粗乱、消瘦、喘气、关节肿大、跛行等，淘汰率达到12%。

2剖检病变

共剖解4头保育病猪，均为40日龄大小，主要病变为：肺脏表面有出血点和有纤维素渗出与胸腔粘连；肾脏萎缩变薄颜色灰白，且有针尖状出血点；锯齿脾，边缘有出血点；关节肿大，肿大部手触较软，解剖开为乳白色的粘稠的积液；全身多处淋巴结水肿出血。

3实验室诊断

采集该猪场发病仔猪病料和26份血清样品，委托四川农业大学实验室进行病毒感染的诊断，笔者进行抗体检测，细菌分离鉴定等。

血清中CFSV、PRRSV、PRV、PCV-2的抗体检测（ELISA法）参照康百得公司ELISA诊断试剂盒说明书进行。

3.1细菌的分离与鉴定

无菌操作下，将新鲜的肺脏、关节积液、脾脏直接涂片，美兰染色后，镜检观察细菌形态特征；并将其涂于含5%小牛血清的TSA平板和5%兔血平板上，用接种环划开，置于37℃培养过夜，观察溶血现象。挑取平板上优势菌群的单个菌落再次接种于5%小牛血清的TSA平板，采用菌落划线法划开，37℃培养12小时～18小时，以此纯化得到一株细菌，经形态学观察、生理生化特性鉴定以及PCR检测，确定该菌为链球菌。

3.5药敏试验

根据K-B纸片扩散法，共选取了阿奇霉素、庆大霉素、强力霉素、四环素、丁胺卡那、先锋霉素V、恩诺沙星、氨苄青霉素、红霉素、氟苯尼考、氟哌酸等11种抗生素进行药敏试验。

4试验结果

4.1CFSV、PRRSV、PRV、PCV-2的PCR检测结果

被检病猪编号分别为1、2、3、4号样品，结果显示：1、2、4号样品猪瘟阴性，3号样品猪瘟为阳性；1、3、4号样品蓝耳为阳性，2号样品蓝耳为阴性；圆环和伪狂犬PCR检测均为阴性。所有阴性、阳性对照结果正常，RT-PCR未检出高致病蓝耳。

4.2血清中CFSV、PRRSV、PCV-2的抗体检测（ELISA法）

根据待检孔A值大于阴性对照A值平均值的2.1倍者为阳性的判定标准，ELISA抗体检测结果见表1。

注：CSF抗体合格率平均为65.4%，其中流产母猪抗体阳性率为100%，发病保育猪抗体阳性率为62.5%，健康保育猪抗体阳性率为50%；PRRS抗体阳性率平均为5707%，其中流产母猪抗体阳性率为100%，发病保育猪抗体阳性率为62.5%，健康保育猪抗体阳性率为16.7%；RCV-2抗体阳性率平均为76.9%，其中流产母猪抗体阳性率为100%，发病保育猪抗体阳性率为87.5%，健康保育猪抗体阳性率为33.3%。

4.3组织样品中细菌的分离与鉴定

无菌操作下，将关节腔积液样品触片，经美兰染色后镜检，观察到有链状的球型细菌存在。经37℃培养18h后，血平板上出现α溶血环；平板上长出细小，圆形，凸起的灰白色菌落。革兰氏染色镜检观察到阳性球菌，呈卵圆形，单个或成双、短链排列。此株细菌经理化特性鉴定和16SrRNA测序比对，被确定为链球菌。

4.4药敏试验

分离菌药敏试验结果见表2，结果显示：该细菌对氟苯尼考、氟哌酸、氨苄青霉素等药物敏感，对庆大霉素、丁胺卡那、阿奇霉素、四环素、强力霉素、恩诺沙星、先锋霉素V、红霉素等药物有不同程度的耐药性。

5控制措施

5.1隔离措施

猪场封闭管理，病猪舍和健康猪舍饲养人员分开，病猪舍人员在舍内生活与住宿。

5.2消毒措施

5.2.1高效消毒剂聚维酮碘喷雾，带猪消毒每日一次，猪舍外消毒每两日一次，进入猪舍的物品均严格喷雾消毒。

注：根据CLSI指南M45——非常见分离菌或苛养菌抗菌药物稀释和纸片敏感试验方法，判断标准为：“S”表示高度敏感，抑菌圈直径≥20mm；“I”表示中介敏感，15mm＜抑菌圈直径小于19mm；“R”表示不敏感，抑菌圈直径≤14mm。

5.2.2场区过道和猪舍两侧用生石灰铺撒，防止行人之间交叉污染。

5.3药物控制措施

根据药品试验结果及支持疗法需要，采用以下药物控制。

5.3.1饮水给药：维生素电解质以及葡萄糖，按照说明书用量兑水14日。

5.3.2混料给药：优质氟苯尼考、磺胺氯哒嗪钠可溶性粉（注册商标：副嗜康）以及消毒散，因为采食量降低了30%，所以上述药品按说明书治疗用量酌情增加剂量，混合拌料，连用7天。

5.3.3注射给药：针对严重减料甚至绝食的猪只，运用黄芪多糖注射液与双黄连注射液混合注射用头孢噻呋钠，按说明书用量，治疗第一日每日两次，此后每日一次，根据猪的恢复情况连用3日～4日。

5.4紧急接种措施

对于未发病猪舍一律紧急接种猪瘟脾淋组织苗3头剂，同时使用维生素电解质兑水3日。

5.5淘汰措施

针对病情特别严重无治疗价值的猪只，进行焚化处理。

5.6处置结果

经过上述处理后，有的猪只7日～10日康复，有的15日～20日康复，总体死亡和淘汰率12%，三周后猪场恢复正常生产管理，此后的管理中，建议该场将圆环病毒2型纳入免疫。

6.讨论与分析

6.1本研究结合流行病学调查、临床表现、病理剖解变化以及实验室诊断，对该猪场此次疫病的抗原感染情况进行了摸底，诊断该猪场存在猪瘟、蓝耳病毒混合感染，虽然未检测出PCV-2病原，但检测出了PCV-2抗体，几乎可确认PCV-2也是感染的。

6.2本病例继发了链球菌感染，根据细菌药敏试验结果，可选用氟苯尼考、氨苄青霉素、氟哌酸等高敏药物作为治疗和预防药物，注射可采用大剂量头孢噻呋钠，要特别注意药物的交叉和配伍使用，以免产生耐药性。

6.3针对病毒病感染，目前没有特效药物治疗，只有依靠疫苗紧急接种和预防免疫接种进行防控，同时具有免疫增强型中药如消毒散，可以缩短病程。

6.4根据实验室抗原抗体检测结果，本场的母猪和保育仔猪虽然免疫过猪瘟弱毒疫苗，但CSF抗体水平阳性率平均只有65.4%，抗体很不好，本场PCV-2感染阳性，并检测出PRRSV，应存在PCV-2和PRRSV引起的免疫抑制，很多文献都有类似报道。