畜牧猪伪狂犬病母源抗体衰减规律及适时首免试验

猪伪狂犬病母源抗体衰减规律及适时首免试验

杜喜忠 杨民 楼芳芳 孔旭东

浙江金华市农业科学研究院； 浙江金华市金东区畜牧兽医局

猪伪狂犬病是猪的一种重要的病毒性传染病，可造成种猪繁殖障碍、仔猪早期大量死亡、商品猪生长迟滞。20世纪80年代以后，我国许多省市均报道了伪狂犬病的暴发流行，给养猪业造成巨大的经济损失。近年来，随着规模化猪场对免疫预防的重视，该病在我国的大规模流行已得到较好的控制。然而猪伪狂犬病病毒潜伏感染或隐性带毒仍比较普遍，往往出现零星发病或以继发病原出现在混合感染病例中。因此，如何有效控制和净化本病，已是养猪人士和专家学者们共同关注的重要话题，迄今为止，疫苗接种仍是预防控制以至最终根除伪狂犬病的主要措施之一。为制定合理的免疫程序，笔者于2011年3月～8月在金华市农业科学研究院金华猪选育场开展了猪伪狂犬病母源抗体衰减规律和疫苗最佳首免时间试验。现将试验情况汇报如下，以供参考。

1材料与方法

1.1试验材料

试验猪为产前30天免疫伪狂犬病疫苗的伪狂犬病野毒调查gE抗体阴性金华猪母猪所产的未免疫金华猪纯繁仔猪。

猪伪狂犬病疫苗为国内某厂生产的猪伪狂犬病gE基因缺失苗“伪易灵”，批号：100901、110401。

猪伪狂犬病gB抗体ELISA检测试剂盒，批号：GF339、LF076、MF331，由美国IDEXX生产，购自北京爱德士元亨生物科技有限公司。

1.2试验方法

1.2.1母源抗体衰减规律试验

选择胎次相同、产期相近的4窝未免疫仔猪，每次每窝随机选3头，共12头，分别在3日龄和1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周龄每头前腔静脉采血3毫升～5毫升，分离血清，同批次作伪狂犬病病毒gB抗体检测，根据gB抗体阳性率、S/N值分析母源抗体变化规律。

1.2.2最佳首免时间试验

选择6窝胎次相同、窝仔数12头以上的仔猪，每窝随机分成6组，分别在1、2、3、4、5、6周龄作伪狂犬病免疫；母源抗体衰减规律试验的4窝仔猪，7、8、9、10周龄采血后作伪狂犬病免疫；每头1头份，3周后前腔静脉采血3毫升～5毫升，分离血清，同批次作gB抗体检测，根据gB抗体阳性率、S/N值，结合母源抗体衰减规律确定最佳首免时间。

1.2.3抗体检测

gB抗体检测严格参照试剂盒使用说明进行。结果判定：被检样品抗体S/N值＞0.7，判定为阴性；被检样品S/N值＜0.6，判定为阳性；被检样品S/N值在0.6～0.7之间为可疑。

1.2.4数据统计分析

gB抗体阳性率统计删除可疑样品；为方便数据比较分析，将S/N值转化为（1－S/N值）×100%。试验数据采用Excel软件统计分析。

2结果与分析

试验猪各阶段伪狂犬病gB抗体检测结果见表1。

2.1试验猪伪狂犬病母源抗体消退情况

从表1可见，母猪产前30天免疫，所产仔猪能获得高水平的母源抗体，本次试验猪10周龄母源抗体阳性率仍为54.55%；随着试验猪日龄增大，母源抗体水平逐渐降低，抗体阳性率从前4周的100%逐渐降至10周龄的54.55%，抗体水平（S/N值转化值）从3日龄的96.24%逐渐下降至10周龄的38.98%，与周小兵等（2008）报道的国产伪狂犬病gE基因缺失苗免疫母猪所产仔猪母源抗体变化情况基本相符；其中在2周龄～5周龄、6周龄～8周龄下降较快，与朱玲等（2004）报道的仔猪伪狂犬病母源抗体在14日龄～21日龄、30日龄～60日龄2次出现较大幅度的降低基本相符。说明虽然仔猪能从母乳获得较高水平伪狂犬病母源抗体，但随着日龄增大抗体逐渐消退，应及时免疫以避免免疫空白期。

2.2试验猪伪狂犬病适时首免情况

从表1可见，本次试验仔猪5周龄前免疫，猪伪狂犬病抗体水平不升反而有所下降，1日龄～3周龄免疫后3周gB抗体阳性率分别从100%、100%、100%下降到50%、44.44%、28.58%，gB抗体水平（S/N值转化值）分别从86.23%、66.75%、68.08%下降到49.55%、48.38%、33.52%；4周龄免疫，3周后虽然抗体水平略有提高，但抗体阳性率从90%降至60%；而5、6周龄免疫，3周后抗体阳性率分别从70%、62.5%提高到77.78%、100%，3周后抗体水平分别从41.83%、41.19%提高到78.63%、91.6%；7、8、9、10周龄免疫，3周后抗体阳性率均在75%以上，抗体水平逐步提高。说明5周龄前仔猪母源抗体水平较高，母源抗体干扰主动免疫，疫苗抗原中和母源抗体，引起抗体水平下降，反而容易出现野毒感染。

注：1.抗体水平为（1－S/N值）×100%的转化值；2.母源抗体衰减试验的4窝猪从7周龄开始每次采血后作伪狂犬病首免，免疫后的猪就不在下次母源抗体衰减试验采血的候选中，因此从8周龄开始母源抗体衰减试验采血实际是在未免疫猪中选样本，至9周龄其中1窝只有4头未免疫猪，只好分成每次2头，故出现9、10周龄母源抗体衰减试验及伪狂犬病首免试验（12、13周龄检测抗体）样本数为11头。

综合猪伪狂犬病母源抗体衰减变化和不同时间首免情况，根据最佳首免日龄应在母源抗体能保证仔猪抵御病毒感染且接种疫苗能发挥最大效果的时候这一原则，笔者认为：本次试验最佳首免时间为35日龄～42日龄。

3小结

试验再次证明，母猪产前30天免疫猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗，仔猪能获得高水平母源抗体，本次试验至10周龄伪狂犬病抗体阳性率尚有54.55%，与周小兵等（2008）报道的国产伪狂犬病gE基因缺失苗免疫母猪所产仔猪母源抗体变化情况基本相符，对保护新生仔猪不发生伪狂犬病具有重要意义。

本次试验表明，仔猪5周龄前免疫，gB抗体阳性率和S/N值转化值均下降，说明母源抗体可能抑制仔猪主动免疫的建立，而且疫苗抗原中和母源抗体，出现免疫后的抗体水平低于同期母源抗体水平。因此，在伪狂犬病疫苗免疫接种程序的设计上，克服被动免疫获得的母源抗体对仔猪主动免疫的抑制是关键。

根据最佳首免日龄应在母源抗体能保证仔猪抵御病毒感染且接种疫苗能发挥最大效果的时候这一原则，本次试验仔猪伪狂犬病最佳首免时间应为35日龄～42日龄。

猪伪狂犬病抗体酶联免疫吸附试验快速、简便、准确，是临床常用方法，虽然S/N值不是真实的抗体滴度水平，只能作为判断抗体阳性的依据，但从本次试验看其动态变化与抗体阳性率动态变化基本吻合，因此，笔者认为临床可以根据S/N值判断猪群伪狂犬病抗体大致水平。