水产动物药物学系列(43)：研究与应用

“水产动物药物学系列(43)”是一部专注于水产动物药物学领域的丛书。该系列涵盖了水产动物疾病防治、药物利用、药物残留等多个方面的内容，旨在为养殖业者、兽医和研究人员提供最新的药物学知识和技术。本系列汇集了国内外众多专家学者的研究成果，包括对不同水产动物病原体的药物防治研究，药物安全性评价，以及药物在水产养殖中的应用技术等方面的内容。无论是从学术角度还是实践应用角度，该系列都将为读者提供全面深入的信息，促进水产养殖业的可持续发展。

芽孢杆菌类

芽抱杆菌是一种需氧的非致病菌，以内孢子的形式存在于肠道微生物群落中，不消耗饲料养分，可保持饲料的质量，进入肠道后在肠道上迅速复活，复活率接近100％。它能使空肠内的pH下降，氨浓度降低并消耗大量的氧，维持肠道厌氧环境，抑制病原菌的生长，维持肠道正常生态平衡，并有平衡乳酸菌的作用；它能分泌较强活性的蛋白酶及淀粉酶，促进淀粉、纤维素等分解。

芽孢杆菌的抗逆性很强，具有耐高温、耐酸碱、耐挤压等特点，可耐受颗粒饲料加工影响。有试验证明在对虾饲料中添加5株芽孢杆菌经过整个生产工艺流程制粒后饲料中芽孢杆菌存活95％。另有资料报道，地衣芽孢可耐受121℃高温，4～5min而保持活性。目前，应用的主要有枯草芽孢菌、凝结芽孢杆菌、缓慢芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、东洋芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、芽孢乳杆菌和丁酸梭菌等。在使用时多制成该菌休眠状态的活菌制剂，或与乳酸菌混合使用。

由于上述特点芽孢杆菌是所有菌种中最理想的微生物添加剂，近年来法、德、美等国家进入我国的益生菌种主要是芽孢杆菌。

枯草芽孢杆菌

【别名】深海芽孢杆菌，马铃薯芽孢杆菌，面包芽孢杆菌。

【种属名称】芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌种。

【来源】从干草浸液中分离得到。常见菌种有ATCC7058、ATCC7059等。

【菌种特征】杆状，很少成链，通常为（0.7～0.8）µm×（2.0～3.0）µm。染色均匀，鞕毛侧生，能运动。革兰氏阳性，芽孢呈椭圆形或柱状，中生或偏生，0.8µm×（1.5～1.8）µm，游离孢子表面着色弱。琼脂培养基上的菌落圆或不规则形，表面色暗，变厚和不透明，可起皱，可呈奶油色或褐色，菌落的形状随培养基成分不同而有很大变化。当琼脂培养基表面潮湿时，菌落易于扩散。在琼脂培养基上生长的菌苔在液体中不易扩散。在培养液中生成色暗、皱褶、完整的膜，培养液轻度混浊或不混浊。生长温度最高为45～55℃，最低为 5～20℃，最适温度为37℃。

【有效成分】活性枯草芽孢杆菌。

【功用】调节肠道菌群，维持微生态平衡。能抑制动物消化道中的大肠杆菌、沙门氏菌和促进乳酸杆菌生长的作用。枯草芽孢杆菌代谢产生的多肽类物质（枯草菌素）对某些有害菌也有抑制或杀灭作用。能分泌大量细胞外酶如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、脂肪酶及卵磷脂酶等，同时也分泌活性抗菌物质及挥发性代谢产物，提高母猪、肉仔鸡等动物的生产性能，提高饲料转化率和氨的利用率，减少氨和吲哚类化合物的生成。可提高动物对钙、磷、铁的利用，促进维生素D的吸收。同时具有净化养殖池塘水质的作用。

【鉴别和检测方法】参照中华人民共和国进出口商品检验行业标准《出口食品平板菌落计数》（SN 0168-1992）和《伯杰氏细菌鉴定手册（第8版）提供的方法执行。

（1）鉴别方法：革兰氏阳性，接触酶阳性。能发生V-P反应，7%氯化钠和 pH5.7可生长。能利用葡萄糖、阿拉伯糖、木糖和甘露醇产酸，能水解淀粉。可利用柠檬酸盐作为碳源，能还原硝酸盐成亚硝酸盐。可分解酪素。石蕊牛奶产碱胨化等生化反应均为阳性。厌气生长，在葡萄糖琼脂上或酪氨酸琼脂上形成可溶性黑色素， 28℃下水解马尿酸盐。不能利用丙酸盐分解酪氨酸，在55℃生长的菌株不被0.02%的叠氮化合物抑制。

(2)检测方法摘要：参考培养基 ：

除硫酸锰外，将各成分混合于水中，加热溶解。然后加入硫酸锰溶液，混匀。116℃高压灭菌15min，制成平板，进行计数。

【使用方法】添加于饲料或池水中使用。在饲料中添加量一般为1×100000000cfu/kg。

净化水质。采用市售（或自制）芽孢杆菌，在水温20℃以上时，直接泼洒于水体，一般其效价（菌含量）应为6×1000000000cfu/ml活菌。泼洒量为：鳗池，首次用15g/m3水体，3d后用7g/m3水体，以后每隔7d用2g/m3水体泼洒；虾池，首次用10g/m3水体，以后每隔7～10d用2g/m3水体泼洒1次;鱼池，首次用15g/m3水体，以后每隔15d 用2g/m3水体泼洒1次。

促进生长与防病。育苗池，在苗种入池前泼洒本品。用量：鱼苗池30g/m3 水体，虾苗60～120g/m3水体，贝苗120～150g/m3水体;还可以将本品拌在饲料中投喂水生动物，在饲料中按总量的1%左右拌入，直接或加工成配合饲料后投喂（加工的温度与压力要根据菌种的特点而设定）。

【注意事项】一般不与抗生素混用。

【规格】一般含活菌量1×100000000cfu/g（ml）。

【储存方法】密闭储存于阴凉、通风、干燥处。

纳豆芽孢杆菌

【别名】纳豆菌

【种属名称】芽孢杆菌属纳豆芽孢杆菌种

【来源】从纳豆制品中或从自然界的稻、谷上面分离得到。常见菌种有ATCC15245、AS1.1086、AS1.107、CICC10023（=AS1.107）、CICC10261、CICC10262、和CICC10263。

【菌种特征】纳豆菌通常为（0.7～0.8）µm×（2.0， 3.0）µm，革兰阳性。生长在葡萄糖琼脂的细胞原生质染色均匀。芽孢椭圆形或柱状，中生或偏中生，即使孢囊膨大，也不显着，有鞭毛， 能运动。生长温度最高为45～55℃， 最低为5～20℃。孢子耐热性强。

【有效成分】活性纳豆芽孢杆菌。

【功用】产酸，调节肠道菌群，增强动物细胞免疫反应。并能生成多种蛋白酶（特别是碱性蛋白酶）、糖化酶、脂肪酶、淀粉酶，降解植物性饲料中某些复杂的碳水化合物，从而提高饲料的转化率。

【鉴别和检测方法】参照中华人民共和国进出口商品检验行业标准《出口食品平板菌落计数》(SN 0168 - 1992) 提供的方法执行。

（1）鉴别方法 根据菌种的生化特征进行鉴别。

（2）检测方法摘要 BPY 培养基配方：

121℃高压灭菌20min，制成平板

无菌取3g样品，移入27ml无菌水中，溶解后作10倍系列稀释到0.0000001，取0.1 ml滴加在BPY固体培养基上，用T型棒涂匀，作3个平行样。37℃下培养24～48h，进行活菌计数。

【使用方法】添加于饲料或饮水中使用。在饲料中添加量一般为1×1000000cfu/g（ml）。

【注意事项】一般不与抗生素合用，否则会降低其效果，甚至诱导纳豆菌产生耐受性。

【储存方法】密闭储存于阴凉、通风、干燥处。

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